Estava a rever os artigos mais interessantes deste mês e dei de caras com um novo método de avaliação da espressão de proteinas em tecidos.
O sistema chama-se MELC e basicamente é um sistema de microscopia robotisado que permite que vários anticorpos/lectinas sejam analisados sequencialmente através de ciclos de incubação, acquisição de imagem e “photobleaching”. Sendo assim a mesma amostra e estrutura histológica pode ser analisada para várias dezenas de antigénios mantendo-se a topologia. Facilmente se podem depreender as avantagens do sistema. Por exemplo várias subpopulações linfocitárias que invadem um tecido tumoral podem ser avaliadas para sua diversidade e capacidade funcional, ao mesmo tempo que marcadores tumorais.
Um recente artigo publicado este mês no jornal Cancer Research por Berndt et al utiliza esta tecnologia e mostra um estudo comparativo entre as várias fases de evolução neoplásica do cancro do colon: mucosa normal do colon, “ulcerative colitis” e cancro colorectal.
Neste artigo os autores avaliam a presença de linfócitos CD8, CD4, ou CD3 em conjugação com outros anticorpos dirigidos contra CD25, CD45RA, CD45RO, NF-Kb, HLA-DR, Bcl2, Bax, Caspase3/8, CD2 (molécula de co-estimulação em linfócitos), CD15 (relacionado com a adesão ao endotélio e marcador de neutrófilos), CD11 (alpha-integrina), CD29 (beta2-integrina), CD54 (ICAM-1), e CD58 (LFA-3 ligando de CD2). Os autores concluem:
- o número de linfócitos activados é superior à colite e mucosa normal.
- CD4+CD25+ são mais frequentes na mucosa normal que no cancro colorectal e num estado não activado (NK-Kb negativas), sendo o número de CD4+CD25+ activadas (NF-Kb+) superior na colite.
- O número de linfócitos T CD4 e CD8 activados é superior no cancro do colon que na mucosa normal.
- O número de linfócitos T memória (CD45RO) no cancro do colon é superior a mucosa normal.
- Os linfócitos T parecem resistentes a apoptose, expressando quantidades superiores de Bcl-2 que na mucosa normal.
- Neutrófilos são frequentes no cancro e potencialmente resistentes à apoptose expressando Bcl-2 e sendo caspase8 negativos
- No cancro do colon em comparação com a mucosa normal linfócitos T, sobretudo CD8+ expressam mais CD29 (beta-integrina), ICAM-1 e LFA-3
- As células NK são frequentes no cancro e expressam moléculas de adesão.
Portanto neste estudo sobre 10 biopsias/grupo de tecido obtidas por endoscopia, pode-se retirar uma enorme quantidade de informação sobretudo pela sua complementaridade. A mesma amostra permite retirar um elevado numero de informações mantendo-se a topologia tri-dimensional do tecido constante. A conjugação sequencial de vários anticorpos na mesma amostra permite a analise multiparamétrica de um tecido ou célula dentro do seu contexto histológico e funcional.
Embora o estudo seja relativamente pouco aprofundado, permite desde já obter uma elevada quantidade de informação.
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